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【摘要】 目的： 为了研究尿激酶型纤溶酶原激活系统(uPA系统)中的尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA )及其受体(uPAR )和尿激酶型纤溶酶原激活剂抑制剂(PAI-1)在正常子宫内膜及子宫内膜异位症(内异症)患者的在位内膜和异位内膜上的表达，探讨三者与内异症发生的关系。方法：运用免疫组化法分别检测正常子宫内膜和内异症患者的在位内膜及异位内膜病理蜡块标本中的uPA uPAR PAI-1表达水平。结果：正常子宫内膜与子宫内膜异位症(内异症)患者在位内膜和异位内膜中uPA uPAR PAI-1表达水平有显著差异，差异有统计学意义(P<0.05，P<0.01);内异症患者的在位内膜和异位内膜中uPA uPAR PAI-1表达水平有显著差异，差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论：子宫内膜组织中uPA、uPAR、PAI-1的表达的变化可能与子宫内膜异位症的发生、发展有关。 【关键词】 子宫内膜异位症;尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA );及其受体(uPAR);尿激酶型纤溶酶原激活剂抑制剂(PAI-1) Abstract：Objective：To study the expression of uPA， uPAR and PAI-1 in the ectopic endometriosis and in the normal endometrium to explore the hypothesis that uPA， uPAR and PAI-1 play a role in the development of endometrosis.Methods：The expression of uPA， uPAR and PAI-1 in the ectopic endometrium was detected by immunohistochemistry streptavidin-biotin peroxidase method.Results：The expression levels of uPA， uPAR and PAI-1in the ectopic endometrium were higher than those in the eutopic endometrium with endometriosis and the normal endometrium(P<0.05，P<0.01) There was a significant difference in the expression o f uPA， uPAR and PAI-1 between ectopic and the eutopic endometrium(P<0.05).Conclusion：The change of uPA， uPAR and PAI-1 expression in ectopic and eutopic endometrium may be related to the pathogenesis endometriosis. Key words：endometriosis; urokinade plasmenogen activato; urokinase plasminogen activator recepto r; plasminogen activator inhibitor-1 子宫内膜异位症( endometriosis， EM s)简称内异症[7]，是指有功能的子宫内膜生长在子宫腔以外的部位，是育龄妇女的常见疾病，内异症为良性病变，但具有类似恶性肿瘤的远处转移和种植生长能力，其发病机制尚未完全阐明。本研究采用免疫组化(s-p)法，旨在检测uPA、uPAR、PAI-1在正常子宫内膜以及内异症患者在位内膜和异位内膜的表达情况，以探讨uPA、uPAR、PAI-1与内异症发生发展的关系，为今后内异症的诊断，治疗等提供新的依据。 1 材料和方法 1.1 资料来源 实验组：佳木斯大学附属第一医院病理科病理存档石蜡标本中子宫全切的病人，年龄26～57岁，实验组：30例为子宫内膜异位症患者(不包括子宫腺肌症)，分别取其在位内膜和异位内膜作为实验组，对照组30例为除外子宫内膜病变的其他子宫全切患者，如子宫肌瘤，采用免疫组化S-P法检测标本中uPA、uPAR及PAI-1的表达情况。标本均经过 10%甲醛溶液固定，常规石蜡包埋。 1.2 主要试剂 兔抗人 uPA多克隆抗体;兔抗人uPAR多克隆抗体; 兔抗人PAI-1多克隆抗体;兔链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶超敏试剂盒(S-P)。 1.3 方法 免疫组化染色 所有标本经10%福尔马林固定、脱水、石腊包埋、连续切片。采用免疫组化检测uPA、uPAR、PAI-1在异位内膜、在位内膜及对照组正常内膜的表达水平。 1.4 结果判定 单盲法阅片：由两名病理科医师独立观察切片中10个高倍视野。阳性标准：在组织基底膜，腺细胞浆及胞膜，细胞外基质中出现棕黄色颗粒，每张切片在光学显微镜下观察uPA uPAR PAI-1的染色分布与深浅， 其染色强度高于背景染色为阳性。 定量：对所有切片进行染色图像强度和面积的定量分析。每张切片采用医学图像分析系统随机测量3 个区域的阳性吸光度值。再取三个吸光度值的平均值作为此张切片的最终结果. 吸光度越大阳性表达越强。 1.5 统计学分析 采用SAS软件包进行多组间方差分析，两组间采用T-Test检验。 2 结果 uPA、uPAR 及PA I-1在各组子宫内膜中的表达： uPA、uPAR 及PA I-1主要表达于腺上皮细胞浆， 尤其腺上皮基底膜表达较强， 少量表达于间质细胞。异位内膜与在位内膜中腺上皮和间质细胞的阳性染色较强， 呈明显的棕黄色阳染而正常子宫内膜组织中腺上皮与间质细胞的着色均较浅。统计结果表明， 异位内膜组织中uPA、uPAR、PA I-1的表达高于内异症在位内膜和正常子宫内膜， 差异有统计学意义(P<0.05，P<0.01); 内异症患者在位内膜与正常子宫内膜之间差异有高度统计学意义(P<0.05)， 见表1。 表1 内异症患者的在位内膜、异位内膜和正常子宫内膜的uPA uPAR PAI-1表达强度 3 讨论 3.1 uPA、uPAR 及PA I-1在子宫内膜异位症发生、发展中的作用 子宫内膜异位症是妇科常见疾病之一，近来有明显增高趋势，有3%～10%的育龄妇女患有此病，不孕患者中有25%～35%有子宫内膜异位症存在[1]。大量研究结果表明，虽然内异症是良性疾病，而易位内膜的粘附，侵袭和血管生成三部曲(即3A模式)及细胞无限生长和调亡数量减少，类似恶性肿瘤的生物学行为才是发病的关键[9]。 细胞外基质(ECM)是降解子宫内膜异位症组织细胞侵袭和种植的关键环节。基底膜细胞外基质是否完整是判断异位内膜细胞有无浸润和侵袭的标志。研究表明， uPA 系统与异位内膜细胞降解ECM 密切相关。uPA 系统主要包括uPA、uPAR、PA I-1。异位内膜组织中uPA、uPAR、PA I-1的阳性表达高于对照组，表明异位内膜中过度表达的uPA 和uPAR 可能使异位内膜具有很强的蛋白水解能力， 能够降解其周围的基底膜及其它ECM成分，破坏腹膜间质细胞的连接，进而侵袭腹膜及异位病灶周围组织，Shaw等[4]也认为，uPA对异位内膜细胞的增生、转移和侵袭生长很重要。体内、外实验均已证实， uPAR 表达上调可改变细胞表面纤溶酶原活性并进而影响细胞的侵袭转移能力[5]。 uPA还具有促血管生成作用， 使异位内膜得以种植生长并不断扩大。PA I- 1为丝氨酸蛋白酶主要的生理性抑制剂， 它是uPA有效的特异性抑制剂， 从而抑制ECM 和基底膜的降解。异位内膜中增高的PA I-1， 可能是异位内膜本身生成的， 用以保护自身免遭uPA 的破坏。 3.2 uPA、uPAR 及PA I-1在子宫内膜异位症在位内膜中的表达及意义 uPA uPAR 及PAI-1在内异症患者的异位内膜和在位内膜中的表达无明显的周期性， uPA uPAR 及PAI-1在异位子宫内膜及再位子宫内膜中的表达均高于对照组，同时三者在异位子宫内膜的阳性表达亦高于在位子宫内膜。国外文献显示， 内异症在位内膜中uPA、uPAR、PA I-1的表达水平较正常子宫内膜明显升高[2]，uPA、uPAR、PA I-1mRNA 的表达亦显著增强[6]。提示在内异症患者的月经期有大量uPA 随内膜碎片逆流至腹腔进而增强纤溶酶活性。这也许是异位内膜得以成功种植和生长的关键性条件， 从而也从纤溶降解方面解释了尽管许多妇女有经血逆流， 却仅有部分人发生内异症的现象。 Shaw[8]及B ruse[2] 认为，uPA uPAR PAI-1在异位内膜中持续表达较高，失去周期性，说明uPA uPAR PAI-1在整个月经周期的持续高表达，致使内异症病情迁延不愈。 综上所述，对于内异症的发病机制众说不一，无一学说能完全阐述所有的病例，但内异症发生发展的基本过程为粘附、侵袭、转移、生长，已被广泛接受。该过程涉及许多激素、细胞因子、酶、免疫等调节作用，其中纤溶系统降解细胞外基质的作用不可忽视，uPA系统是纤溶系统的重要组成部分，它在内异症中的表达显著高于正常人群，uPA系统将纤溶酶原激活为纤溶酶，后者直接或间接激活基质金属蛋白酶协同降解ECM和基底膜中的多种成分，还可能诱发新生血管产生及血管生成，从而参与了内异症的发生发展。uPA系统在调节内异症的发生、发展过程中，还与许多酶、细胞因子相互作用，深入研究 uPA系统及其相关调控机制在内异症中的作用，有助于提高对内异症病因病机的认识，从而可能为治疗内异症提供新思路、新方法。
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